På torvet i Skjulstrup står Tosse-Torben og sælger sin avis Jagten på sandheden. Han påstår, at døgnet har 25 timer, og at ingen ved, hvor den ekstra time bliver af. Vennerne Charlie, Amir og Vega sætter sig for at undersøge sagen, og snart hvirvles de ind i et mysterium, der både omfatter en forsvunden professor, et mystisk broderskab og en oppustelig enhjørning.

Den 25. time er andet bind i Jagten på sandheden - en humoristisk action-serie om venskaber, vanvittige teorier og om en by, hvor intet helt er, som det ser ud til.